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霉菌酵母菌測(cè)試片

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1、原理及適用范圍 

      霉菌和酵母菌廣泛存在于空氣、水和土壤中,絕大部分對(duì)人體無(wú)害,但有些霉菌對(duì)人體有害,比如說(shuō)黃曲霉,它分泌的黃曲霉毒素是一種強(qiáng)致癌物。霉菌還可引起食物霉變,會(huì)刺激人體消化道、胃部等,嚴(yán)重的還可損傷肝臟,造成食物中毒。霉菌酵母菌測(cè)試片(FilmplateTM Enumeration of moulds and yeasts BM207)由營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。

       與傳統(tǒng)方法相比,省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時(shí)可以開(kāi)始進(jìn)行抽樣檢測(cè),而且操作簡(jiǎn)便,通過(guò)酶顯色劑的放大作用,使菌落提前清晰地顯現(xiàn)出來(lái),培養(yǎng)時(shí)間由一周縮短為72h。本品可用于各類食品(如糕點(diǎn)、餅干等)中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù),非常適合于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)(GB  4789.15)。 

 

2、操作方法 

2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL無(wú)菌水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),振搖30min,制成1:10的樣品勻液,用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL無(wú)菌水的試管內(nèi),反復(fù)吸吹50次成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。 

2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將霉菌酵母菌測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)用無(wú)菌水做空白陰性對(duì)照。 

2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為28℃±1℃,培養(yǎng)48~72h。 

 

3、結(jié)果判讀 

霉菌和酵母菌在測(cè)試片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示藍(lán)色斑點(diǎn),霉菌菌落顯示的斑點(diǎn)略大呈放射狀,酵母菌落則較小而圓滑,許多霉菌在培養(yǎng)后期會(huì)呈現(xiàn)其本身特有的顏色。選擇菌落數(shù)在10CFU~150CFU的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)算兩個(gè)測(cè)試片的平均值乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(克)樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。 

 

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 

4.1計(jì)數(shù)

4.1.1 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于150CFU,則對(duì)稀釋度zui高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),按平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例1)。

4.1.2 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于10CFU,則應(yīng)按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例2)。

4.1.3 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例3)。

 

4.2報(bào)告

4.2.1 菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。

4.2.2 菌落數(shù)大于或等于100時(shí),前三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面用0代替位數(shù),也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。

 

例次

稀釋度及菌落數(shù)

選定計(jì)數(shù)

稀釋度

報(bào)告方式

CFU/gCFU/mL

10-1

10-2

10-3

1

2

3

多不可計(jì)

8

0

352

5

0

169

1

0

10-3

10-1

1×10

1.7×10 5

8.0×10

1×10

 

5、附加說(shuō)明

由于霉菌常以孢子的形式在空氣中到處傳播,而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得檢出,因此檢測(cè)霉菌時(shí)需特別小心操作,取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細(xì)消毒,接種時(shí)盡量避免空氣流動(dòng),動(dòng)作要干凈利落,每次zui好用無(wú)菌水接兩片空白對(duì)照,以免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,

1、原理及適用范圍 

      霉菌和酵母菌廣泛存在于空氣、水和土壤中,絕大部分對(duì)人體無(wú)害,但有些霉菌對(duì)人體有害,比如說(shuō)黃曲霉,它分泌的黃曲霉毒素是一種強(qiáng)致癌物。霉菌還可引起食物霉變,會(huì)刺激人體消化道、胃部等,嚴(yán)重的還可損傷肝臟,造成食物中毒。霉菌酵母菌測(cè)試片(FilmplateTM Enumeration of moulds and yeasts BM207)由營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。

       與傳統(tǒng)方法相比,省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時(shí)可以開(kāi)始進(jìn)行抽樣檢測(cè),而且操作簡(jiǎn)便,通過(guò)酶顯色劑的放大作用,使菌落提前清晰地顯現(xiàn)出來(lái),培養(yǎng)時(shí)間由一周縮短為72h。本品可用于各類食品(如糕點(diǎn)、餅干等)中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù),非常適合于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)(GB  4789.15)。 

 

2、操作方法 

2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL無(wú)菌水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),振搖30min,制成1:10的樣品勻液,用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL無(wú)菌水的試管內(nèi),反復(fù)吸吹50次成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。 

2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將霉菌酵母菌測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)用無(wú)菌水做空白陰性對(duì)照。 

2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為28℃±1℃,培養(yǎng)48~72h。 

 

3、結(jié)果判讀 

霉菌和酵母菌在測(cè)試片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示藍(lán)色斑點(diǎn),霉菌菌落顯示的斑點(diǎn)略大呈放射狀,酵母菌落則較小而圓滑,許多霉菌在培養(yǎng)后期會(huì)呈現(xiàn)其本身特有的顏色。選擇菌落數(shù)在10CFU~150CFU的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)算兩個(gè)測(cè)試片的平均值乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(克)樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。 

 

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 

4.1計(jì)數(shù)

4.1.1 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于150CFU,則對(duì)稀釋度zui高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),按平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例1)。

4.1.2 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于10CFU,則應(yīng)按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例2)。

4.1.3 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見(jiàn)例3)。

 

4.2報(bào)告

4.2.1 菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。

4.2.2 菌落數(shù)大于或等于100時(shí),前三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面用0代替位數(shù),也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。

 

例次

稀釋度及菌落數(shù)

選定計(jì)數(shù)

稀釋度

報(bào)告方式

CFU/gCFU/mL

10-1

10-2

10-3

1

2

3

多不可計(jì)

8

0

352

5

0

169

1

0

10-3

10-1

1×10

1.7×10 5

8.0×10

1×10

 

5、附加說(shuō)明

由于霉菌常以孢子的形式在空氣中到處傳播,而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得檢出,因此檢測(cè)霉菌時(shí)需特別小心操作,取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細(xì)消毒,接種時(shí)盡量避免空氣流動(dòng),動(dòng)作要干凈利落,每次zui好用無(wú)菌水接兩片空白對(duì)照,以免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

6、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,

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